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微生物過氧化物酶(POX)ELISA試劑盒技術(shù)說明書
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  微生物過氧化物酶(POX)ELISA試劑盒技術(shù)說明書

  BS-5182 微生物過氧化物酶(POX)ELISA試劑盒

  一、實(shí)驗(yàn)原理

  本試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA技術(shù),通過以下步驟實(shí)現(xiàn)POX定量檢測(cè):

  固相包被:微孔板預(yù)包被抗POX捕獲抗體,形成固相載體。

  抗原結(jié)合:待測(cè)樣本中的POX與捕獲抗體特異性結(jié)合,形成抗體-抗原復(fù)合物。

  酶標(biāo)顯色:加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,通過TMB底物顯色反應(yīng),顏色深淺與POX濃度呈正相關(guān)。

  二、試劑盒組成

  組分規(guī)格保存條件

  預(yù)包被微孔板96孔/板2-8℃(避光)

  POX標(biāo)準(zhǔn)品6濃度梯度-20℃

  HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體1瓶4℃(避光)

  TMB顯色底物1瓶4℃(避光)

  終止液(2M H?SO?)1瓶室溫

  三、操作步驟

  樣本處理

  微生物培養(yǎng)液:離心(10,000g,10min)取上清,避免反復(fù)凍融。

  組織勻漿:按1:5比例加入PBS(pH 7.4)勻漿,離心后取上清。

  檢測(cè)流程

  加樣:每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本,37℃孵育90分鐘.

  洗滌:棄液后拍干,重復(fù)洗滌3次(每次300μL PBS-Tween) .

  顯色:加入TMB底物100μL,避光反應(yīng)15分鐘,終止后測(cè)450nm吸光度.

  四、注意事項(xiàng)

  試劑保存:TMB底物需避光保存,避免凍融.

  交叉污染:移液槍頭需一次性使用,不同樣本間更換槍頭.

  數(shù)據(jù)有效性:標(biāo)準(zhǔn)曲線R2需≥0.98,樣本OD值需在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi).

  五、技術(shù)參數(shù)

  靈敏度:≤0.5 pg/mL(超靈敏型) .

  檢測(cè)范圍:0.5-2000 pg/mL(線性范圍).

  批內(nèi)/批間變異系數(shù):<10%。

  注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒

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