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人CD14分子(CD14)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-9960 人CD14分子(CD14)ELISA試劑盒
試劑盒組成
預(yù)包被微孔板：96孔板，預(yù)包被抗CD14單克隆抗體(可拆卸式設(shè)計)
標(biāo)準(zhǔn)品：凍干重組CD14蛋白(濃度梯度：9.375-600ng/mL，需用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液復(fù)溶)
檢測抗體：生物素標(biāo)記抗CD14多克隆抗體(100×濃縮液，需稀釋后使用)
酶結(jié)合物：HRP標(biāo)記鏈霉親和素(100×濃縮液)
配套試劑：
TMB顯色液(A/B液分裝)
終止液(2M LS)
洗滌緩沖液(30×濃縮，需稀釋)
樣本稀釋液(含1% BSA的PBS緩沖液)
樣本處理要求
血清/血漿：EDTA抗凝，3000rpm離心10分鐘，避免溶血;建議稀釋倍數(shù)1:10-1:50
細胞上清：離心去除顆粒物，直接檢測或-20℃分裝保存(避免反復(fù)凍融)
組織勻漿：按1:9加入PBS(pH7.4)勻漿，離心取上清
實驗步驟
標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋：用樣本稀釋液配制6個濃度梯度(最高濃度600ng/mL，9.375ng/mL)
加樣孵育：
每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本，37℃避光孵育90分鐘
棄液后每孔加350μL洗滌緩沖液，重復(fù)洗滌5次
顯色檢測：
加入100μL生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘
洗滌后加入100μL酶結(jié)合物工作液，37℃孵育30分鐘
加入TMB顯色15分鐘，終止液終止反應(yīng)，450nm測OD值
數(shù)據(jù)分析
標(biāo)準(zhǔn)曲線：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，四參數(shù)擬合法繪制曲線
靈敏度：檢測限3.3ng/mL，線性范圍9.375-600ng/mL
注意事項
試劑盒保存：未開封時標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存，其他組分4℃或-20℃分裝(TMB顯色液需4℃避光)
避免使用含NaN3的樣本，HRP活性會被yizhi
實驗建議：同一批次完成檢測，不同數(shù)據(jù)不可直接比較
注：以上資料僅供參考，如需產(chǎn)品具體資料請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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